光学显微镜下几种照明方式的特点分析

光学显微镜下几种照明方式的特点分析

光学显微镜的照明方式是指显微镜在不同的应用领域中，根据所研究样品的性质以及规格尺寸的不同，所要采取的一种方便观察的照明方式，其中我们今天要说的就是光学显微镜下几种常见的照明方式的特点。我们常见的几种照明方式有：明场照明、暗场照明、斜照明、莱茵伯格照明（暗场照明的另一种形式）等。我们来进行逐一分析。

明场照明

明场照明是光学显微镜中最简单的一种照明方式。常见的是在倒置显微镜应用中，只需采用白光对样品进行照射即可。所成图像的对比度取决于样品各部位对光的吸收效果。采用这种照明方式的缺点是大多数生物样品的对比度都很低，并且会由于离焦信息的干扰导致分辨率也较低；优点是设备简单，样品也无需进行加工处理。

暗场照明

使用暗场照明方式的暗场显微镜通过采集样品散射的光线来提高无色透明样品的图像对比度。在实际使用中为了只收集样品的散射光，暗场照明方式需要采用准直光源将进入像平面的透射光（未散射的部分）强度降到最低。相比前两种照明方式，暗场照明方式缺点是光强较弱导致的成像时间过长。

斜照明

相较于明场照明和暗场照明，斜照明方式的成像立体感要高一点，其优点是能够使样品的图像产生一种三维效果，从而将样品中一些原本看不到的结构凸显出来。目前常用的“霍尔曼调制对比度”技术就是基于斜照明方式的基础上发展而来。斜照明方式一般用在细胞培养室中的倒置显微镜中。其缺点和明场类似，因此采用斜照明方式并不能显著提高对比度和分辨率。

莱茵伯格照明

莱因伯格照明方式实际上是暗场照明的一种特殊形式。主要区别仅仅只是在光源通过聚光器的路上插入彩色的透明滤光片，从而可以用颜色来区分样品中不同空间的成分，例如可将有结构的样品显示为红色，而均匀的背景则显示为蓝色，或者其它不同颜色的组合。